一、技術原理
試劑盒基于環(huán)介導恒溫擴增技術(LAMP)熒光法檢測,利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶,使模板兩端引物結合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結構,引物順利與模板結合并進行鏈置換擴增反應,實現(xiàn)在恒溫條件下(60-65℃)進行連續(xù)快速擴增。反應體系中加入了顯色指示劑,陰陽性結果顯色差異顯著,擴增結束后可以通過觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結果,無需開蓋避免了擴增產(chǎn)物交叉感染性的可能性。LAMP是一種新型的恒溫核酸擴增技術,該技術無需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設計要求,只需提供一個適宜的恒定溫度即可,因此,與常規(guī)PCR相比,LAMP技術更適合現(xiàn)場高通量快速檢測,具有簡單、快速、特異性強的特點。
二、應用于食品中沙門氏菌的快速檢測
恒溫擴增熒光法檢測技術可運用于快速檢測食品中的沙門氏菌等致病菌。 應用于食品快速檢測有兩種方式: 1、快速篩查。對食品樣品快速增菌后,直接采用基因檢測試劑盒來快速篩查有沒可疑致病菌(對大多數(shù)致病菌在13小時內(nèi)即可完成篩查); 2、快速鑒定。對食品樣品進行增菌,平板分離,使用基因檢測試劑盒對可疑菌落進行快速準確的鑒定(1小時內(nèi)完成鑒定)。
三、環(huán)凱恒溫擴增熒光法檢測試劑盒組成
四、環(huán)凱恒溫擴增熒光法檢測試劑盒操作指南
五、環(huán)凱恒溫擴增熒光法檢測試劑盒特點
操作簡單:通過幾部加樣后,60-65℃范圍內(nèi)恒溫條件下即可完成擴增。
使用便捷:一管式凍干,免去繁瑣的配制步奏。 儀器簡單 擴增條件簡單,能提供恒溫裝置即可。
特異性高:比傳統(tǒng)PCR靈敏度高10-100倍,可檢測5-20個拷貝。
快速判讀:使用合適的增菌液收集到足夠菌體后,40-60分鐘內(nèi)可完成檢測,肉眼觀察顏色變化即可判讀結果。全部檢驗流程僅需約13h(詳細檢驗流程參見說明書)。
六、沙門氏菌快速篩選操作流程
七、沙門氏菌可疑菌落快速鑒定操作流程
八、恒溫擴增試劑盒產(chǎn)品列表
九、需要配套的儀器及耗材列表